除皱针的注射物为肉毒素，所以注射除皱针后，不会立马见效。如果注射在表情肌处，除皱针起效时间为1周左右，如果在咬肌等较肥厚的咀嚼肌处，作用时间较长，通常在1个月以后才会起效。
因为除皱针主要是通过阻断神经和肌肉连接，使神经信号传导不到肌肉，使肌肉失去收缩效果。因为患者注射除皱针后，肌肉会出现运动减缓，运动减缓后，运动形成的皱纹便会减轻，才能产生除皱效果，所以不是立刻出现，通常是逐渐显现。
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